羟甲基化-全基因组羟甲基化测序（ACE）
该技术是一种全新的鉴定5hmC的方法。DNA脱氨酶APOBEC3A(A3A)能够特异地脱去C及5mC的氨基使其变为U，而5hmC则因为不被该酶识别，测序时仍被识别为C。该技术利用该酶的这种特性，特异性地检测基因组上发生的5hmC修饰。
ACE-seq原理示意如下：
（1）利用β-葡糖基转移酶（βGT）将5hmC加上葡糖基，转变成5ghmC，5ghmC不会被A3A酶脱氨基。
（2）利用A3A酶特异去除C和5mC的氨基，使其转变成U，而5hmC保持为C，从而将5hmC和C/5mC区分开来。
技术优势
1）检测范围为全基因组；
2）单碱基分辨率；
3）起始DNA量比常规的oxBS技术降低100倍；
4）高准确性。
实验策略
信息分析
送样要求
研究案例
开发了ACE-Seq技术并利用ACE-Seq探究小鼠脑部神经细胞5mC及5hmC的特征及作用
Nondestructive, base-resolution sequencing of 5-hydroxymethylcytosine using a DNA deaminase
1、背景
传统的鉴定5hmC的技术需要运用化学试剂进行转化，会破坏基因组DNA，且需要的DNA起始量较大。建立一种非破坏性的、低起始DNA量的鉴定5hmC的技术有助于加快加深5hmC的研究。
2、方法
利用DNA脱氨酶APOBEC3A(A3A)特异性脱去C及5mC的氨基使其转变成U的特性，建立了一种新型的鉴定基因组上的5hmC修饰的技术，并将该技术结合BS-Seq技术，研究了小鼠脑部神经细胞5mC及5hmC的特征及作用。
3、结论
分析了小鼠脑部神经细胞5mC及5hmC在不同基因元件的水平；
探究了小鼠脑部神经细胞5mC及5hmC的异质性。
探究了5mC及5hmC在小鼠脑部神经细胞中的作用。
参考文献：
① DOI:10.1038/nbt.4204
