血浆cfDNA提取操作流程
血浆cfDNA提取操作流程（版本：2022年9月）
1、血液样本收集及储存及注意事项
a) 受试者填写知情同意书；
b) 受试者无需特殊准备，无需禁食禁水；
c) 静脉抽血5-10ml，收集到EDTA抗凝血管中,上下颠倒抗凝采血管，轻轻混匀，全血2-8℃保存不超过4h；如用Streck采血管收集全血，则5-8℃保存不超过72h。全血标本不能冷冻保存。
注意：
Streck采血管含有稳定剂，保护细胞不被裂解，cfDNA不被降解，效果优于普通抗凝管；
采血后为防止cfDNA降解和有核细胞破裂，推荐马上分离血浆，提取cfDNA，
-20℃保存；如不能马上提取，常规采血管采血后必须4h内（最好30min-1h内）完成血浆分离，-80℃保存；
严重黄疸、溶血和血脂可能会影响实验结果
2、血浆样本制备储存及注意事项
a) 将采血管中的全血在1500g（相对离心力），4℃离心10min，离心起始和结束尽可能采用缓慢升降速率，防止突然制动；
b) 采用移液器将采血管上层血浆转移至一个新的无DNase/RNase酶的15ml离心管中，一定不要碰触或吸到中间细胞薄层；
c) 将初步收集到的血浆再3000g，4℃进一步离心10min，去除残余细胞；
d) 将再次离心后的血浆转移到无DNase/RNase酶的1.5/2ml离心管或冻存管中，每管分装1ml，-80℃保存。血浆样本不反复冻融；
e) 制备的血浆应不存在溶血、严重黄疸现象。
3、血浆cfDNA的提取
可以选用目前市场上常用的提取试剂盒或磁珠
4、cfDNA样本运输注意事项
大体积干冰运输，按照寄送路上消耗时间，每天至少消耗3-4kg干冰。
