Olink检测样本采集操作流程（血浆）
Olink检测样本采集操作流程（血浆）
1. 目的
针对Olink蛋白组检测，规范血浆样本采集和制备操作流程。
2. 适用范围
本指南适用于从使用抗凝剂的全血中分离血浆样本。
3. 定义和术语
3.1 血浆
血浆（Plasma）是指离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，和血清（Serum）相比，其中含有纤维蛋白原。
4. 设备和器材
4.1 个人防护装备
手套、口罩、实验防护服、护目镜及其它相关防护装备。
4.2 容器
EDTA抗凝采血管（紫色管盖），离心管（无菌消毒）。
4.3 仪器设备
与离心管配套的高速冷冻离心机（离心力可达2000g）。
移液器及无菌枪头。
5. 主要流程
5.1 采血
使用贴好标签的EDTA采血管，配合一次性消毒采血针作静脉穿刺，采血管内的负压使血液自动吸入管中，当收集的血液达到2ml时停止采血，采血管本身含有EDTA抗凝剂，拔出针头后只要将采血管轻轻颠倒8-10次混匀即可。
5.2血浆分离
5.2.1离心：2ml全血采集至EDTA抗凝管后通过离心分离血浆，离心条件为：离心力400~800g，时间10分钟，温度为4℃。
5.2.2转移：离心后上部清液为血浆，用移液器取上部清液血浆至离心管中。
5.2.3二次离心：把装有血浆的离心管进行二次离心，离心条件为：离心力2000g，时间10分钟，温度为4℃。血浆进行二次离心的目的是为了去除所有的细胞碎片等成分。
5.2.4分装：把离心后的上清液分装至1.5ml离心管中，根据检测的目的，分装成几份，其中用于Olink检测的血浆分装量为100μl。
5.3 样本保存
冻存：血浆分装后应立即储存在-80℃冰箱中。
5.4 样本运输
冷链运输。冻存的血浆从冰箱中取出后应立即至于以干冰为冷媒的运输箱中，并保障到达运输目的地后还有剩余干冰，或者采用运输过程中有持续温度监控的运输方式确保样本持续保持低温。
6 注意事项
6.1 同一项目中的样本类型应保持一致（血浆，血清不能混用），以使数据具有可比性。
6.2 同一项目应使用同一种类型采血管，比如统一采用同一品牌同一批次EDTA抗凝管。其他的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠等也可以用于olink检测，但首选EDTA。
6.3 同一项目的样本采集，除操作方法一致外，操作时间，人员，仪器应尽量一致，如采血后到离心的间隔时间、血浆样本离心条件等。
6.4 样本储存条件应尽量一致，如设置温度、时间、冻融次数（尽量避免）等。
6.5 项目开始时，需要提前确认样本编号规则，便于现场操作标记和管理。
6.6 所有的采血管，离心管应在使用前贴好标签，做好标记，以防样本混淆。其中涉及到低温保存部分的保存管，离心管使用的标签必须是耐低温标签。
6.7全血采集到抗凝管后应尽快离心分离，若不能立即分离，在离心分离前室温（22℃）放置不应超过 1 小时或4°C 放置不应超过 8 小时。
6.8分离的血浆外观应淡黄色或黄色，无溶血、无乳糜、无可见异物，无异常。对于溶血，并不影响Olink蛋白组实验的检测，但可能会影响检测结果的准确度。
6.9离心机使用时应注意安全，保持离心机的平衡，且离心机应先预冷，使离心温度保持4℃。对第一次和第二次离心后的试管都要轻拿轻放，避免扰动。
6.10长期保存需让样本保存在-80℃或更低，如中途冻融应保障每个样本的冻融次数一致，以避免冻融次数不同引入的样本差异。生物样本库应提供每个样本状态数据跟踪，并避免无谓的冻融。
6.11一般而言样本在-80°C冰箱可以长期保存，样本也可以放置于液氮中，但在液氮保存的样本应采用带螺口的低温样本保存管，防止炸裂。
