血液样本采集说明
血液样本采集说明（版本：2022年9月）
A、血液样本采集说明
1、用于提取RNA 的全血保存方法及运输要求
全血 mRNA 中含有高丰富度的 globin mRNA 转录本。这些转录本可以占到全部 mRNA 组分中的 50-80%。这些转录本序列保守，研究价值极为有限，因此其存在会造成数据浪费， 并显著降低对其他低丰富度转录本的灵敏性。由于 globin mRNA 主要来自成熟红细胞，因此我们建议全血提取时先分离有核细胞后，再提取总 RNA。
分离白细胞或者有核细胞方法（须在血液采集后半小时内进行，血液不能冻存） 亦可用实验室自有办法进行白细胞分离
a) 在已加入抗凝剂（推荐 EDTA，禁止使用肝素）的新鲜全血中加入等体积 PBS（1×），
温柔的颠倒混匀数次，不要剧烈震荡；
b) 缓慢转入另一已加入淋巴细胞分离液的离心管中，并使上述混合液处于淋巴细胞分离液液面之上（即两种液体不要混合，保留清晰的接口），3000g 离心 30min；
c) 用移液器小心分离出白细胞层：用PBS（1×）清洗白细胞，离心回收白细胞，弃去上清；
d) 按 2ul 血液分离的白细胞加入 1ul TRIzol 的比例加入适量 TRIzol 试剂，用吸头将细胞团吹打散，或者剧烈震荡混匀，使细胞完全溶于 TRIzol 中充分裂解；
转移至-80℃低温保存，送样时选择干冰寄送
如若实验室实在没有办法进行白细胞分离，亦可寄送全血样品，要求如下：
收集全血，每 250ul 的全血样品加入 750ul 的 Trizol LS（Ambion），充分混匀，每个样品处理 2-4 管，-80℃保存，干冰寄送。
2、用于提取 DNA 的全血保存方法及运输要求
DNA 提取样品同样推荐预先进行白细胞分离，分离后的白细胞-80℃保存，干冰寄送，2ul 全血分离的白细胞基本可以满足实验要求。
若实验条件不能满足白细胞分离，采血后的全血可分装在冻存管，-80℃保存，干冰寄送全血样品进行 DNA 提取。
